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酵母蛋白抽提試劑盒說明書
更新時(shí)間:2020-11-09 點(diǎn)擊量:1596

                                                                                                                    

酵母蛋白抽提試劑盒說明書

 

Yeast Protein Extraction Kit

目錄號(hào):K0890   

保存:蛋白酶抑制劑混合物:-20℃

    其它組分:室溫  

 

組分說明

 

Catalog no.                   K0890       K0890A

Kit Size                      25  次       100  次

Yeast Protein Extraction Reagent           25 ml       100 ml

蛋白酶抑制劑混合物                         250  μl        1 ml

 

產(chǎn)品簡(jiǎn)介

 

      酵母蛋白抽提試劑用于從酵母細(xì)胞中快速,高效而溫和地抽提可溶性蛋白。采用試劑處理,可以避免激烈的機(jī)械處理造成的氧化和熱度升高對(duì)目的蛋白的破壞作用。使用方便,避免了重復(fù)性差的研磨法,超聲波法或壓榨法對(duì)酵母細(xì)胞的破壞。本抽提試劑可用于提取啤酒酵母、裂殖酵母、枯草芽孢桿菌、大腸桿菌及革蘭氏陽(yáng)性菌的蛋白抽提。與傳統(tǒng)方法相比,

處理得到的提取液中可溶蛋白產(chǎn)量大,活性高,提取快速;提取液可以直接用于 Ni-NTA  、GST 等親和純化。酵母蛋白抽提試劑盒中帶有蛋白酶抑制劑混合物,可有效避免蛋白提取過程中蛋白的降解。

 

注意事項(xiàng)

 

 1. 提取液中含有去污劑,不宜使用受去污劑干擾的蛋白定量方法。

 

 2. 為了獲得實(shí)驗(yàn)j效果,請(qǐng)根據(jù)實(shí)驗(yàn)調(diào)整Z佳使用量。

 

 3. 本產(chǎn)品僅用于科研。

操作步驟  

 

 1.  酵母培養(yǎng)液3000 xg,4℃,離心5分鐘(離心后馬上抽提或置于-20℃或-80℃保存)。

 

 2.  請(qǐng)?jiān)诘鞍壮樘崆叭〕鰧?shí)驗(yàn)所需蛋白抽提試劑進(jìn)行預(yù)冷,  按照1:99比例加入蛋白酶抑制劑混合物(例如990μl抽提試劑中加入10μl蛋白酶抑制劑混合物),使蛋白酶抑制劑混合物在抽提試劑中成1×工作液。

 

     注意:在進(jìn)行蛋白抽提前2-3分鐘內(nèi)加入蛋白酶抑制劑混合物。

 

 3.  按照每50 mg酵母加入500  μl酵母蛋白抽提試劑加入抽提液,渦旋振蕩或上下吸打使酵母充分重懸。

 

 4.  將細(xì)胞懸液置于冰上,孵育20分鐘(每間隔幾分鐘輕微搖晃一下)。

 

 5.  12,000 rpm(13,400 xg)離心10分鐘取上清(可提取超過90%的可溶性蛋白,如有需要,可將沉淀進(jìn)行第二次蛋白抽提)。

 

 6.  上清可進(jìn)行下一步的蛋白含量測(cè)定、純化及分析。

 

 

 

實(shí)驗(yàn)代做服務(wù):

ELISA試劑盒免費(fèi)代檢測(cè)

CCK8檢測(cè)

HE染色

蛋白相互作用分析

Western Blot

免疫組化IHC染色

熒光定量PCR

動(dòng)物模型服務(wù)

流式細(xì)胞檢測(cè)

免疫熒光染色

激光共聚焦

DNA甲基化實(shí)驗(yàn)

石蠟/冰凍切片

透射電鏡服務(wù)

掃描電鏡實(shí)驗(yàn)

蛋白雙向(2-D)

動(dòng)物實(shí)驗(yàn)

免疫共沉淀

原位雜交(FIsh)

蛋白質(zhì)純化

分子克隆和質(zhì)粒載體構(gòu)建服務(wù)

組蛋白甲基化磷酸化乙酰化

 

蛋白雙向2D-WB

 

藥理毒理動(dòng)物實(shí)驗(yàn)

 

番紅O固綠染色

明膠酶譜MMP

酶活性檢測(cè)

動(dòng)物造模/模型實(shí)驗(yàn)服務(wù)

 

滬公網(wǎng)安備 31011802001677號(hào)

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